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オルガノイド培養

オルガノイドとは、試験管内で培養可能な、生体内の組織の特徴を有する幹細胞由来の細胞塊のことです1-4)。物理的な細胞外基質(Extracellular Matrix; ECM)や生化学的なシグナル(増殖因子や阻害剤等)の暴露により自己組織化し、高度な自己複製能を有します。また、生体組織に似た構造だけでなく、それに類似した機能も長期間にわたり維持することができます。そのため、従来の培養モデル(2次元培養法、スフェロイド等他の3次元培養法、動物モデル)の弱点を克服できるとされており、次世代培養法として大いに期待されています。オルガノイド培養が主に応用されている分野は次の通りです。

  • 発生生物学5-9)
  • 病理学10-22)
  • 薬物の有効性・毒性試験23-26)
  • 再生医療27-30)
  • 個別化医療15,18,26,31,32)

オルガノイドは、検体から採取した初代細胞(ヒト幹細胞 - hAdSCs)または多能性幹細胞(hPSCs – ヒト誘導多能性幹細胞やヒト胚性幹細胞等)を人工細胞外マトリックスの中に包埋し、由来組織に応じたシグナル分子(低分子やタンパク質等)を投与することで樹立されます3)

以下の表は、由来組織別で典型的なオルガノイド培地成分(マトリックス成分、基本培地、複製成分からなる添加剤は未記載)をリスト化したものです。

由来組織 前駆細胞 培地成分 引用文献
小腸 hAdSCs A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], Y-27623 [Y0018], SB202190, EGF, Rspondin1, Noggin, Wnt-3a 33
hPSCs EGF, Rspondin1, FGF-4, Noggin, Wnt-3a, Activin A 34
大腸 hAdSCs A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], Y-27623 [Y0018], SB202190, EGF, Rspondin1, Noggin, Wnt-3a 33
hAdSCs A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], Y-27623 [Y0018], EGF, Rspondin, FGF-10, Gastrin, Noggin, Wnt-3a 11
hPSCs CHIR 99021 [C2943], Y-27623 [Y0018], Retinoic Acid [R0064], EGF, FGF-4, BMP-4, Noggin, Activin A, Wnt-3a 12
hAdSCs A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], Y-27632 [Y0018], SB202190, Rspondin1, FGF-7, FGF-10, Noggin 35
hPSCs <分化用>
SB431542 [B4003], SANT-2, SU-5402, bFGF, Noggin, SHH, SAG, Activin A

<オルガノイド培養用>
CHIR 99021 [C2943], SB431542, FGF-4, Noggin
36
hPSCs Y-27632 [Y0018], Heparin [H0393], 2-Mercaptoethanol [M0058], bFGF, Insulin 37
肝臓 hAdSCs <オルガノイド培養用>
Y-27632 [Y0018], A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], Forskolin [F0855], EGF, Rspondin1, FGF-10, Gastrin, Noggin, Wnt-3a, HGF

<オルガノイド樹立後分化用>
A83-01 [A3324], DAPT [D4257], Dexamethasone [D1961], EGF, FGF-19, BMP-7, Gastrin, HGF
17
hPSCs bFGF, BMP-4, Activin A, HGF, Oncostatin M 38
膵臓 hAdSCs A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], EGF, Rspondin1, FGF-10, Gastrin, Noggin, Wnt-3a 20
腎臓 hPSCs <分化用>
CHIR 99021 [C2943], 2-Mercaptoethanol [M0058], Heparin [H0393], Retinoic Acid [R0064], 1-Thioglycerol [T0905], bFGF, FGF-9, BMP-2, BMP-4, Insulin, Activin A, Holo-transferrin

<オルガノイド培養用>
CHIR 99021 [C2943], Heparin [H0393], FGF-9, HGF, GDNF
39, 40
前立腺 hAdSCs Y-27623 [Y0018], A83-01 [A3324], Nicotinamide [N0078], N-Acetylcysteine [A0905], SB202190, Prostaglandin E2 [P1884], Testosterone [T0027], EGF, Rspondin1, FGF-10, bFGF, Noggin 41
hPSCs <分化用>
FGF-10, Activin A, Wnt-10b

<オルガノイド培養用>
Retinoic Acid [R0064], Testosterone [T0027], EGF, Rspondin1, Noggin
42

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引用文献

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