SH基と特異的に反応するタンパク質

No.179(2018/11発行)

B5944: Bovine Serum Albumin Maleimide Conjugate (1mg×3) (1)
H1621: Horseradish Peroxidase Maleimide Conjugate (0.5mg×3) (2)
T3531: Streptavidin Maleimide Conjugate (0.5mg×1) (3)

　マレイミド基は，pH 6.5～7.5の溶液中でチオール基（SH基，スルフヒドリル基）と化学選択的に反応し，安定なチオエーテル基を形成します^1）（図1）。また，この性質を利用することで，タンパク質中のSH基との特異的な反応に利用することができます。

図1.　チオール基とマレイミド基の反応

　タンパク質では，SH基はシステインの側鎖に存在します。一方，システインを含まないタンパク質については，SATAやSATPなどのチオール付加試薬を用いることで，タンパク質中の第一級アミノ基にSH基を導入することが可能です。さらに，タンパク質内のSH基がジスルフィド結合を形成している場合は，DTTや2-MEAなどの還元剤でジスルフィド結合を切断することでSH基を露出させることができます。
　1，2および3はそれぞれ，ウシ血清アルブミン，ペルオキシダーゼ（西洋わさび由来），ストレプトアビジンにマレイミド基を導入した試薬で，SH基を含むタンパク質やペプチドとの特異的な反応に用いられます。例えば2を使用すると，簡単に抗体をHRP標識することができます（図2）。また，各製品は使い切りサイズで小分けされているため，試薬の秤量の手間が省けます。