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糖鎖を丸ごと付加する酵素 / Endo-M
No.122(2004/04発行)
- A1651
- Endo-M Recombinant from Mucor hiemalis expressed in Candida boidinii Purity: single band by SDS-PAGE(85 KDa)
- A1680
- Endo-M Recombinant from Mucor hiemalis expressed in Candida boidinii Purity: several bands by SDS-PAGE
* 1unitは,pH6.0,37℃において,(Man)6(GlcNAc)2-Asn-dansylに作用させた時,1分間あたりに1μmolのGlcNAc-Asn-dansylを生じる酵素量。
Endo-Mは,山本らが糸状菌Mucor hiemalisの培養液より見出したエンド-β-N-アセチルグルコサミニダーゼで,糖タンパク質のアスパラギン結合糖鎖のジアセチルキトビオース結合を加水分解し,タンパク質側にN-アセチルグルコサミン1残基を残して糖鎖を遊離させます。その際,適当な受容体が存在すると遊離した糖鎖がその受容体に転移します1)。
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羽田ら2)はシアロトランスフェリン糖ペプチド,アシアロトランスフェリン糖ペプチド,高マンノース型糖鎖を有するペプチドにEndo-Mを作用させ,9-フルオレニルメトキシカルボニルアスパラギニル-N-アセチルグルコサミン(Fmoc-Asn(GlcNAc))に糖鎖を転移させています。また,稲津らの開発した方法によりヒト絨毛性性腺刺激ホルモン(hCG)の部分ペプチドhCG(β12-16)にGlcNAcを導入したペプチドを合成し,これにシアロ複合型糖鎖を転移させています。稲津ら3)の開発した方法は,N末をFmocで保護したアスパラギン酸とGlcNAcのアジドから合成されるFmoc-Asn(GlcNAc)をFmoc-Asn-OHの代わりに使用し,ジメチルチオホスフィン酸混合酸無水物(Mpt-MA)法を用いるもので,GlcNAcを有する人工ペプチドの簡便な合成法といえます。この方法とEndo-Mを組み合わせることにより,糖鎖ペプチドを自由に設計し,調製することができます。この方法は,化学−酵素合成法として,山本の総説にまとめられています4)。また,Endo-Mは,本来糖鎖を持たない物質に糖鎖を導入し,新たな機能の発現にも利用されています5)。
Endo-Mは従来から知られているEndo-β-GlcNAc-aseと異なり,高マンノース型糖鎖,混成型糖鎖のみならず複合型糖鎖にも作用する基質特異性の広い酵素で,適当な受容体に糖鎖を転移させることができることから多方面での応用が期待されています。
◎本酵素はNEDOプロジェクトの成果として製品化されました◎
文献
- 1)S. Kadowaki, K. Yamamoto, M. Fujisaki, K. Izumi, T. Tochikura, T. Yokoyama, Agric. Biol. Chem. 1990, 54, 97.
- 2)K. Haneda, T. Inazu, K. Yamamoto, H. Kumagai, Y. Nakahara, A. Kobata, Carbohydr. Res. 1996, 292, 61.
- 3)M. Mizuno, I. Muramoto, T. Kawakami, M. Seike, S. Aimoto, K. Haneda, T. Inazu, Tetrahedron Lett. 1998, 39, 55.
- 4)K. Yamamoto, J. Biosci. Bioeng. 2001, 92, 493.
- 5)S. Kojima, T. Hasegawa, T. Yonemura, K. Sasaki, K. Yamamoto, Y. Makimura, T. Takahashi, T. Suzuki, Y. Suzuki, K. Kobayashi, Chem. Commun. 2003, 1250.
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また,地域等によって販売製品が異なります。製品詳細ページが表示されない場合は,販売は行っておりませんのでご了承ください。
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