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CAS RN: | 製品コード: R0237

rMOA-LecBeads [for Galα(1-3)Gal]

× rMOA-LecBeads [for Galα(1-3)Gal]

純度（試験方法）:
別名:
  • rMOA-レックビーズ [for Galα(1-3)Gal]
  • rMOA-アガロース
  • リコンビナントシバフタケ由来アグルチニンアガロース
  • リコンビナントシバフタケ由来レクチンアガロース
  • rMOA-Agarose
  • Recombinant Marasmius oreades agglutinin (= rMOA)-Agarose
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製品補足情報
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製品補足情報:

Product information
Product code : R0237
Product name : rMOA-LecBeads [for Galα(1-3)Gal]
Preparation : Recombinant MOA is covalently coupled with agarose gel
Quantity : 1 ml gel/2 ml (1:1, v/v slurry) suspended in PBS, pH7.5
Protein concentration : about 10 mg/ml gel
Binding capacity : >10 mg of glycoprotein (Cetuximab) /ml gel
Preservative : 0.02% [w/v] Sodium azide
Stabilizer : None

Description
The rMOA is an Escherichia coli recombinant of carbohydrate-binding protein (Lectin) derived from Marasmius oreades. This lectin preferably binds to a [Galα(1-3)Gal] glycan epitope (It very slightly interacts with melibiose).
The LecBeads is a lectin-immobilized agarose which is capable of capturing glycoproteins via binding to its specific epitope(s), and it is prepared by a covalent coupling method between lectin and agarose.
The Lectin-catch method using LecBeads (as shown in Application tab) is available for selective separation of glycoconjugates (glycoproteins, glycolipids, and so on). This rMOA1a-LecBeads (1 ml gel) shows a binding capacity of about 10 mg or more Cetuximab through its binding to a terminal [Galα(1-3)Gal] glycan epitope on Cetuximab.

Storage
Store at 2-10°C. (Avoid freezing).

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製品コード R0237
等級 SU
物理的状態（20℃） 液体
保管温度 冷蔵 (0-10°C)
避けるべき条件 熱
規格表
外観 白色～ほとんど白色透明液体～濁った液体
濃度(ﾛｰﾘｰ法) 9.0 mg/mL gel以上
結合能 試験適合(10 mg/mL gel以上、Cetuximab)
物性値（参考値）
GHS
法規情報
輸送情報
利用例
The lectin-catch procedure

< Preparation >
Buffers
Binding buffer : PBS pH7.5
Elution buffer : PBS pH7.5 containing 400 mM melibiose [Product code: M0050] and 0.1% triton-X100　[Product code: P1775]

< Method of the lectin-catch > ※Centrifuge method

Equilibration

  • Prepare the LecBeads in a new tube.
  • Add the Binding buffer into the tube to equilibrate the gel.
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and discard the supernatant. (If necessary, repeat equilibration with the Binding buffer >10-fold volume of the LecBeads appropriately.)

Binding

  • Concentrate or dilute the glycoprotein sample to moderate concentration (e.g., 1 mg/ml) with the Binding buffer [Input fraction], and apply the prepared sample to the tube in which the LecBeads was preliminary equilibrated.
  • Agitate the tube at 4°C (※Generally, a dissociation constants (Kd value) of lectins are tend to be decreased at lower temperature) for a few hours (or overnight).
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and remove the supernatant [Through fraction].
  • Wash the LecBeads by 5 (to 10)-fold of the slurry volume with the Binding buffer several times.


Elution

  • Elute the glycoprotein from the LecBeads by agitation with an appropriate volume of the Elution buffer (e.g. same volume of the LecBeads).
  • Agitate the reaction tube at 4°C or R.T. for a few hours (or overnight).
  • Centrifuge the tube at 800 ×g for 3 min and remove the supernatant [Elution fraction].
  • Check the resulting fractions ([Input fraction] [Through fraction] [Elution fraction]) by protein assay and SDS-PAGE. (In some cases, the repetitive elution step with a small volume of the Elution buffer might improve the elution effect. If necessary, repeat elution steps.)
  • The competitive oligosaccharide included in the obtained elution fractions can be removed by ultrafiltration or dialysis using a sufficient amount of buffer.

 

文献


記事/パンフレット

TCIメール
[TCIメール No.192] 糖タンパク質捕集試薬：レクチン固定化アガロース‟レックビーズ”
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