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ミトコンドリア用蛍光染色剤
ミトコンドリアの機能異常とそれによる活性酸素種（ROS）の発生は代謝疾患やがん、神経疾患、老化などと深く関係しています。それらの疾病の診断や治療法の開発において重要なミトコンドリアの品質管理（mitochondrial quality control, MQC）、ミトコンドリアの形態学的変化であるミトコンドリアダイナミクス、マイトファジーの研究にはミトコンドリア用蛍光染色剤が有用です。ミトコンドリア用蛍光染色剤として知られているテトラメチルローダミンメチルエステル、さらにSinghらによって開発された高特異性、低細胞毒性、安定性を兼ね備えるボロンジピロメテンベースのミトコンドリア染色剤 BIP (製品コード：B6123)、CF-MONO（製品コード：C3661）、CF-BI（製品コード：C3662）を紹介します1)。
テトラメチルローダミンメチルエステル (TMRM)
TMRMは、膜電位を有するミトコンドリアを染色するカチオン性の膜透過性蛍光色素です。0.1M リン酸ナトリウムバッファー（pH 7.4）中で最大吸収波長554nm、最大蛍光波長577nmを示します2)。膜電位が消失すると蛍光強度が低下するため、ミトコンドリア膜電位 (mtMP/MMP)の評価に使用されます3)。
TMRM（Tetramethylrhodamine Methyl Ester）Perchlorateの化学構造式
図. 膵臓癌細胞における活性ミトコンドリアの免疫蛍光染色写真（文献4より引用）。
低酸素状態（下段）ではミトコンドリアの電位が損なわれており、TMRMが蓄積していません。
高特異性と低細胞毒性を兼ね備えたボロンジピロメテンベースのミトコンドリア染色剤
BIP、CF-MONO、CF-BIは、Singhらが開発した新規のミトコンドリア染色剤です1)。これらはボロンジピロメテンベースの色素で電気的に中性であり、JC-1やTMRMといったカチオン性色素と異なり、ミトコンドリアの脱分極を引き起こさないため細胞毒性が低いことが特徴です。
| 蛍光染色剤 | λabs. max | λem. max | ε (M-1 cm-1) |
|---|---|---|---|
| BIP | 498 nm | 510 nm | 89,562 |
| CF-MONO | 570 nm | 589 nm | 122,947 |
| CF-BI | 645 nm | 666 nm | 126,865 |
これらのミトコンドリア染色剤は pH による光学的性質の変化が小さく、また光安定性を示すことが報告されています。細胞質画分における蓄積はごくわずかで、核では蛍光が認められなかったという、ミトコンドリアに対する高い特異性も示されています。
特異性が高く、安定で、細胞毒性が低いといった特徴を持つこれら3つのミトコンドリア染色剤は、生細胞におけるミトコンドリアダイナミクスの研究に有用です。
製品
引用文献
- 1) High Affinity Neutral Bodipy Fluorophores for Mitochondrial Tracking
- 2) Development of a Highly Specific Rhodamine-Based Fluorescence Probe for Hypochlorous Acid and Its Application to Real-Time Imaging of Phagocytosis
- 3) Simultaneous evaluation of substrate-dependent oxygen consumption rates and mitochondrial membrane potential by TMRM and safranin in cortical mitochondria
- 4) Monitoring Epithelial–Mesenchymal Transition of Pancreatic Cancer Cells via Investigation of Mitochondrial Dysfunction
| 製品コード | T3608 |
| CAS RN | 115532-50-8 |
| 純度（試験方法） | >98.0%(HPLC) |
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