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用于蛋白免疫印迹的化学发光试剂
化学发光是一种化学反应产生的能量以光的形式释放的现象；化学发光试剂利用这种现象来检测蛋白质和核酸1,2)，以及体内和细胞成像3)。有许多类型的化学发光试剂，它们都使用不同类型的酶和/或底物。例如，在蛋白质印迹法中，最常见的检测方法之一是利用辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺的氧化，释放光1)。
化学发光HRP底物溶液试剂盒是一种通过化学发光检测与膜上蛋白结合的HRP标记探针的试剂。该试剂盒为双组分，在使用前应按1:1混合。虽然检测的灵敏度取决于实验条件，但如下图所示，可以进行高灵敏度的检测。
图. 使用化学发光HRP底物溶液试剂盒的发光的膜
HeLa Cell Lysate: 2.5 - 0.039 μg/lane (2倍梯度稀释)、膜: PVDF膜、阻断缓冲液: 1% BSA/TBS-T、
一次抗体: Anti-GAPDH (Mouse IgG)、二次抗体: Goat anti-Mouse IgG HRP、检测: CCD成像器、曝光时间: 120秒、TCI拍摄。
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文献
- 1) A Luminol/Iodophenol Chemiluminescent Detection System for Western Immunoblots
- 2) Quinone-based antibody labeling reagent for enzyme-free chemiluminescent immunoassays. Application to avidin and biotinylated anti-rabbit IgG labeling
- 3) Seeking Illumination: The Path to Chemiluminescent 1,2-Dioxetanes for Quantitative Measurements and In Vivo Imaging
