糖鎖を丸ごと付加する酵素 / Endo-M

Endo-Mは，山本らが糸状菌Mucor hiemalisの培養液より見出したエンド-β-N-アセチルグルコサミニダーゼで，糖タンパク質のアスパラギン結合糖鎖のジアセチルキトビオース結合を加水分解し，タンパク質側にN-アセチルグルコサミン1残基を残して糖鎖を遊離させます。その際，適当な受容体が存在すると遊離した糖鎖がその受容体に転移します¹⁾。

羽田ら²⁾はシアロトランスフェリン糖ペプチド，アシアロトランスフェリン糖ペプチド，高マンノース型糖鎖を有するペプチドにEndo-Mを作用させ，9-フルオレニルメトキシカルボニルアスパラギニル-N-アセチルグルコサミン(Fmoc-Asn(GlcNAc))に糖鎖を転移させています。また，稲津らの開発した方法によりヒト絨毛性性腺刺激ホルモン(hCG)の部分ペプチドhCG(β12-16)にGlcNAcを導入したペプチドを合成し，これにシアロ複合型糖鎖を転移させています。稲津ら³⁾の開発した方法は，N末をFmocで保護したアスパラギン酸とGlcNAcのアジドから合成されるFmoc-Asn(GlcNAc)をFmoc-Asn-OHの代わりに使用し，ジメチルチオホスフィン酸混合酸無水物(Mpt-MA)法を用いるもので，GlcNAcを有する人工ペプチドの簡便な合成法といえます。この方法とEndo-Mを組み合わせることにより，糖鎖ペプチドを自由に設計し，調製することができます。この方法は，化学－酵素合成法として，山本の総説にまとめられています⁴⁾。また，Endo-Mは，本来糖鎖を持たない物質に糖鎖を導入し，新たな機能の発現にも利用されています⁵⁾。

製品

A1651

Endo-M (Recombinant : from Mucor hiemalis expressed in Candida boidinii)
[Purity : single band by SDS-PAGE (85KDa)]

文献

• Purification and Characterization of a Novel Fungal Endo-β-N-acetylglucosaminidase Acting on Complex Oligosaccharides of Glycoproteins
• S. Kadowaki, K. Yamamoto, M. Fujisaki, K. Izumi, T. Tochikura, T. Yokoyama, Agric. Biol. Chem. 1990, 54, 97.
• Transglycosylation Activity of Mucor Hiemalis Endo-β-N-Acetylglucosaminidase Which Transfers Complex Oligosaccharides to the N-Acetylglucosamine Moieties of Peptides
  • K. Yamamoto, S. Kadowaki, J. Watanabe, H. Kumagai, Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994, 203, 244.
• Transglycosylation of intact sialo complex-type oligosaccharides to the N-acetylglucosamine moieties of glycopeptides by Mucor hiemalis endo-β-N-acetylglucosaminidase
  • K. Haneda, T. Inazu, K. Yamamoto, H. Kumagai, Y. Nakahara, A. Kobata, Carbohydr. Res. 1996, 292, 61.
• A Synthesis of a Glycopeptide Analogue of Eel Calcitonin
  • M. Mizuno, I. Muramoto, T. Kawakami, M. Seike, S. Aimoto, K. Haneda, T. Inazu, Tetrahedron Lett. 1998, 39, 55.
• Chemo-enzymatic synthesis of bioactive glycopeptide using microbial endoglycosidase
  • K. Yamamoto, J. Biosci. Bioeng. 2001, 92, 493.
• Ruthenium complexes carrying a disialo complex-type oligosaccharide: enzymatic synthesis and its application to a luminescent probe to detect influenza viruses
  • S. Kojima, T. Hasegawa, T. Yonemura, K. Sasaki, K. Yamamoto, Y. Makimura, T. Takahashi, T. Suzuki, Y. Suzuki, K. Kobayashi, Chem. Commun. 2003, 1250.

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